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本制品为VEGF兔多抗，配套提供了Western一抗稀释液，可以用于Western检测或其它适当用途时的一抗稀释。

免疫原：a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to a region of human VEGFA.
抗体来源：兔
抗体类型：IgG
克隆性：多克隆
纯化方法：多肽亲和纯化
分子量：27KDa
交叉反应性：人
用途：WB、FC、IHC、ICC、IF

推荐应用	WB	IF	IHC	ICC	FC
稀释比例	1:500～1:1000	1:200	1:200	1:200	1:100～1:200

组分	规格
兔抗VEGF抗体	50μL
Western一抗稀释液	50mL

保存：-20℃，有效期1年。

• Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
  
• 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5～10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。
  
• 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1～3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
  
• 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果，请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。

请根据抗体的实际用途选择相应的使用方法。

• Western检测：
  
  • 按照推荐的稀释比例用百奥莱博提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
    
  • 把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜或室温缓慢摇动2小时，确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
    
  • 回收稀释的一抗，4℃保存以备下次继续使用。
    
  • 按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页：
    Western实验步骤及试剂
• 免疫染色：
  可以使用百奥莱博的免疫染色一抗稀释液(货号：YT088)稀释抗体，使用后注意回收稀释好的一抗，具体操作可以参考如下网页：免疫染色的方法与步骤
  
• 其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。

图1．使用1/500稀释的抗VEGF抗体对不同细胞裂解液中的VEGF进行Western blot分析。
泳道1：Jurkat细胞；泳道2：Hela细胞；泳道3：MCF-7细胞；泳道4：人脑细胞。


图2．应用本抗体对HUVEC细胞(绿色)中的VEGF进行ICC染色，细胞固定在多聚甲醛中，用0.25% Triton X-100/PBS渗透。


图3．应用本抗体对石蜡包埋的人肺癌组织进行免疫组织化学分析。
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